流式细胞分析检测

      流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是七十年代发展起来的高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体,它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状, 还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科广泛应用。

实验仪器

流式细胞仪、激光器、光学系统、流动细胞流、样品注射系统、数据分析软件。

服务内容

淋巴细胞、造血干细胞、内皮细胞和成纤维细胞等多种细胞的分选。

实验流程

细胞准备:收集待分选的细胞样品,并进行必要的预处理,如细胞培养、细胞消化、细胞染色等。

样品准备:将细胞样品洗涤并悬浮在适当的缓冲液中,以获得单细胞悬浮液。

流式细胞仪设置:根据实验需要,设置流式细胞仪的参数,包括激光器波长、荧光探测器、散射光检测器等。

样品注射:将细胞悬浮液通过样品注射系统注入流动细胞流中,使细胞以单个细胞的形式通过流式细胞仪的检测区域。

数据采集:流式细胞仪通过激光激发细胞标记物的荧光,并检测细胞产生的荧光信号和散射光信号。同时,记录每个细胞的相关参数,如荧光强度、散射光强度等。

数据分析:使用流式细胞仪配套的数据分析软件,对采集到的数据进行分析和解读。可以根据细胞的特定性质,如荧光标记物的表达水平,将细胞分为不同的亚群。

分选设置:根据分析结果,设置流式细胞仪的分选参数,如荧光阈值、分选门等。

分选操作:根据设置的分选参数,将目标细胞从细胞悬浮液中分离出来。分选操作可以通过电荷作用、压力差、电磁力等方式进行。

分选收集:将分选得到的目标细胞收集到适当的收集管或培养皿中,以便后续的实验或应用。

清洗和维护:在实验结束后,对流式细胞仪进行清洗和维护,以确保仪器的正常运行和下一次实验的准备。