流式细胞仪、激光器、光学系统、流动细胞流、样品注射系统、数据分析软件。
淋巴细胞、造血干细胞、内皮细胞和成纤维细胞等多种细胞的分选。
细胞准备:收集待分选的细胞样品,并进行必要的预处理,如细胞培养、细胞消化、细胞染色等。
样品准备:将细胞样品洗涤并悬浮在适当的缓冲液中,以获得单细胞悬浮液。
流式细胞仪设置:根据实验需要,设置流式细胞仪的参数,包括激光器波长、荧光探测器、散射光检测器等。
样品注射:将细胞悬浮液通过样品注射系统注入流动细胞流中,使细胞以单个细胞的形式通过流式细胞仪的检测区域。
数据采集:流式细胞仪通过激光激发细胞标记物的荧光,并检测细胞产生的荧光信号和散射光信号。同时,记录每个细胞的相关参数,如荧光强度、散射光强度等。
数据分析:使用流式细胞仪配套的数据分析软件,对采集到的数据进行分析和解读。可以根据细胞的特定性质,如荧光标记物的表达水平,将细胞分为不同的亚群。
分选设置:根据分析结果,设置流式细胞仪的分选参数,如荧光阈值、分选门等。
分选操作:根据设置的分选参数,将目标细胞从细胞悬浮液中分离出来。分选操作可以通过电荷作用、压力差、电磁力等方式进行。
分选收集:将分选得到的目标细胞收集到适当的收集管或培养皿中,以便后续的实验或应用。
清洗和维护:在实验结束后,对流式细胞仪进行清洗和维护,以确保仪器的正常运行和下一次实验的准备。