Western Blot


服务内容

从动物细胞、人或者动物组织、细菌、植物样品中提取蛋白样品。

对蛋白样品进行半定量分析

western检测

电泳:聚丙烯酰氨凝胶电泳分离蛋白样品

转膜:湿转

抗体孵育:使用抗体检测膜上的特定蛋白

信号收集:采用ECL发光法和chemidoc MP进行信号收集分析

样品要求:

细胞>1*107,组织>30mg,菌体湿重>10mg,植物>100mg

客户提供

新鲜或者正确保存的样品(按照我们的要求提供,参照下方注意事项)

提供给客户

正式实验结果(图片

完整的实验报告

灰度值分析(可选)

服务说明

提供的蛋白量与目的待检测的蛋白数量有关,蛋白数量增加相应的样品量也要增加;

胞浆蛋白和胞核蛋白样品来源为:哺乳动物细胞。

每张膜样品数量为1-8个(10孔胶)或者1-12个(15孔胶),不足一张膜的按一张膜收取;


如客户有特殊上样要求,按涉及的实际膜数量进行计算。

请客户提供有质量保证的一抗。抗体的使用量通过预实验后进行确认,不回收利用一抗。

建议提供蛋白的阳性对照品;

免费提供普通内参:beta-actin,GAPDH,beta-tubulin;

双方签订合同后,收取70%的款项后启动实验;

特殊要求请咨询。


注意事项:

对于细胞和一些微生物样本,可去除培养基后,加裂解液制备蛋白样品;若未能及时制备蛋白样品,去除培养基后,将其液氮速冻后保存于-80℃(约一个月)或保存于液氮(约三个月);运输时,样本(含培养基)加冰袋,保持培养基低温但不结冰,或者样本去除培养基后加干冰。

提取蛋白的样本最好是新鲜的,同时,以尽可能地提取有效蛋白为准则;样本需避免反复冻融。

所有样本均不建议保存于-20℃。-20℃时,组织、细胞内的水会结晶,细胞活性和组织微观结构会受到伤害,生物大分子受到组织、细胞内多种因素的影响,稳定性可能会明显降低,但部分纯化的大分子可以短中期保存。

 -80℃保存条件时,样本内的生化反应减弱,可中期保持组织细胞内大分子的稳定性,短期保持细胞活性和组织微观结构;

液氮保存可长期保持组织细胞内大分子的稳定性、细胞活性和组织微观结构;液氮保存时,盛装样本的Ep管管口需用封口膜密封,防止管口爆开造成交叉污染。